比较捷美/精骐191L气套式CO2恒温培养箱与某品牌CO2细胞培养箱对培养不同种类细胞的增殖/活力的影响。
一、实验目的
比较捷美/精骐191L气套式CO2恒温培养箱与某品牌CO2细胞培养箱对培养不同种类细胞的增殖/活力的影响。
二、实验原理
细胞增殖/活力(CCK8):
试剂中的WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),在电子载体存在的情况下,被细胞内的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物,生成的甲瓒产物的量与活细胞的数量成正比。
三、实验准备
3.1细胞培养相关试剂及仪器
恒温水浴锅
CO2恒温培养箱
Esco超净台
冰箱和液氮罐分隔架-MCF系列
冰箱分隔架-UF系列
冰盆/冰桶
3.2样品制备
四、CCK8增殖能力检测
1 通过细胞培养调整细胞状态至对数生长期。
2 在96孔板每孔中铺入细胞,293T细胞和RAW264.7细胞按照1×104/100uL/孔。CD4+ T细胞按照5×105/100uL/孔,注意:铺CD4+ T细胞之前按照1ug/mL anti-CD3包板, 1ug/mL anti-CD28与细胞同时铺板进行活化。
3 在细胞贴壁后48h时,加入10uL CCK8。在1-4h内每半小时测一次OD450nm,取舍数值的原则为尽量把OD值控制在1.0-1.5。
4 最后进行统计学分析:用GraphPad Prism6软件作图及分析实验数据,样本间的比较采用t检验,p<0.05为显著差异。
五、实验结果
六、试用体验
01
自动高温灭菌功能十分方便高效,节约实验人员时间。(权威测试,以下菌种杀灭率>99.999%,大肠杆菌(Escherichia coli)8099,金黄色葡萄球菌(Staphylococcus)ATCC. 6538,白色念珠菌(Candida albicans)ATCC. 10231,黑曲霉(Aspergillus niger)ATCC. 16404,黄曲霉(Asp.flavus)AS3.3950,绿色木霉(Trichoderma viride)AS3.2942)。
02
通过与其他品牌的CO2培养箱对细胞培养的对比结果来看,捷美/精骐191L完全可以满足一般细胞的培养条件。
03
具有断电后通电自动恢复运行状态,可防止培养箱长时间处于关闭状态,导致细胞死亡。
04
运行安静稳定振动极小,对于培养要求较高的脑细胞、神经细胞也可满足。
05
配置彩色触控屏,设置培养条件操作简单;查询培养数据一目了然。
06
如选配WIFI监控器,可在手机进行远程数据监控,调整数据设置等操作。